HIF-1α在氢抑制脂多糖诱导小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用

作者:王慧星; 韩晨阳; 陈红光; 刘靖芷; 马文庭; 李全波; 蒋宁; 霍小东; 于泳浩; 史可梅*
来源:中华麻醉学杂志, 2020, 40(07).

摘要

目的评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在氢抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞, 按照随机数字表法分为4组(n=24):对照组(C组)、LPS组(L组)、富氢液+LPS组(H+L组)和富氢液+LPS +HIF-1α抑制剂二甲氧基雌二醇(2ME2)组(H+L+M组)。L组加入LPS 1 μg/ml孵育6 h;L+H组先加LPS, 换培养基为0.6 mmol/L富氢液共孵育6 h;H+L+M组先给予2ME2 10 μmol/L孵育30 min, 然后加入LPS和富氢液孵育6 h。采用Western blot法测定HIF-1α、Beclin-l、BNIP3和LC3的表达;采用ELISA法检测上清液TNF-α、IL-6和IL-1β的浓度, 采用透视电镜观察细胞自噬小体数量。结果与C组比较, L组上清液TNF-α、IL-6和IL-1β浓度升高, 巨噬细胞HIF-1α、Beclinl和BNIP3表达上调, LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高, 自噬小体数量增多(P<0.05);与L组比较, H+L组上清液TNF-α、IL-6和IL-1β浓度降低, 巨噬细胞HIF-1α、Beclin-l、BNIP3表达上调、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增高, 自噬小体数量增多(P<0.05);与H+L组比较, H+L+M组上清液TNF-α、IL-6和IL-1β的浓度降低, 巨噬细胞HIF-1α、Beclin-l和BNIP3表达下调, LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低, 自噬小体数量减少(P<0.05)。结论 HIF-1α介导细胞自噬激活参与了氢抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞炎症反应的过程。

  • 单位
    天津医科大学总医院; 中心实验室; 天津医科大学第二医院