苗药五藤膏对膝关节炎兔GSK-3β、Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a表达的影响

作者：申海艳; 周静^*; 肖丽娜; 马武开; 姚血明; 陈琳; 韩珊

来源：中国老年学杂志, 2023, 43(14): 3425-3430.

• 膝骨关节炎
• 苗药五藤膏
• Wnt/β-catenin信号通路

目的 基于Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号，探讨不同剂量苗药五藤膏贴敷对KOA模型兔软骨组织中糖原合成酶激酶(GSK)-3β蛋白及Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a mRNA表达的影响。方法 将96只家兔随机分为空白组，模型组，巴布膏对照组，苗药五藤膏低、中、高剂量组；除空白组外均采用木瓜蛋白酶关节腔内注射制备兔KOA模型，空白组正常饲养，不干预；模型组患关节无菌纱布包扎固定，其余各组分别予氟比洛芬巴布膏及不同剂量的苗药五藤膏贴敷干预；给药后第1、2、3、4周各组分别处死动物，取材后观察软骨病理变化及行Mankin评分；采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测关节软细胞中Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a mRNA的表达水平；Western印迹检测GSK-3β蛋白的表达水平。结果 各组关节软骨病理改变比较，经过4 w干预后，除空白组外，模型组患膝关节面软骨重度退性改变；巴布膏对照组关节面软骨轻度退性改变；苗药五藤膏低、中、高剂量组退变程度与剂量呈正相关；空白组、苗药五藤膏低、中、高剂量组、巴布膏对照组改良版Mankin评分均明显低于模型组(P<0.05),且苗药五藤膏低、中、高剂量组组内改良版Mankin评分比较差异均有统计学意义(P<0.05);与空白组比较，模型组、苗药五藤膏低、中、高剂量组、巴布膏对照组GSK-3β蛋白表达水平明显升高，给药后1、2、3、4 w模型组、苗药五藤膏中、低剂量组、给药后4 w苗药五藤膏高剂量组Wnt3a mRNA明显升高(P<0.05),给药后1、2、3、4w模型组、苗药五藤膏中、低剂量组、给药后1 w苗药五藤膏高剂量组、巴布膏对照组Wnt5a mRNA明显升高，模型组、苗药五藤膏中、低剂量组Wnt7a mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比，苗药五藤膏低、中、高剂量组、巴布膏对照组GSK-3β蛋白表达水平明显降低，苗药五藤膏低、中、高剂量组、巴布膏对照组Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a mRNA明显降低(P<0.01)。结论 不同剂量苗药五藤膏干预能使KOA模型兔膝关节软骨细胞GSK-3β蛋白的表达降低；苗药五藤膏可通过干预Wnt/β-catenin信号，降低KOA模型兔患膝关节软骨细胞Wnt信号上游基因Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a mRNA的表达。

• 单位
  贵州中医药大学; 贵州省骨科医院