摘要
目的 探讨四妙勇安汤对于载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)病变及J774A.1小鼠单核巨噬细胞泡沫化的影响。方法 将30只ApoE-/-小鼠按随机数字表法分为模型组、阿托伐他汀组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组6只,给予西方饮食饲料喂养8周后,连续给药8周。阿托伐他汀组给予3.64×10-5 g/d阿托伐他汀(蒸馏水溶解)灌胃,低、中、高剂量组分别给予四妙勇安汤0.164、0.328、0.655 g/d灌胃;另将6只C57BL/6J小鼠作为对照组,给予普通饮食喂养16周,对照组和模型组每日予相同体积的蒸馏水灌胃。采用Movat法观察小鼠主动脉窦形态改变及泡沫细胞含量;免疫荧光染色观察主动脉窦F4/80表达情况。制备四妙勇安汤含药血清,CCK-8法筛选给药浓度;建立氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的单核巨噬细胞株J774A.1泡沫化模型,分为模型组、四妙勇安汤组,另设对照组;采用油红O染色检测细胞脂质吸收;Western Blot法检测各组细胞清道夫受体分子蛋白表达水平。结果 动物实验证明:与对照组比较,模型组主动脉窦病理形态改变明显,斑块内泡沫细胞含量和F4/80阳性表达的细胞数量均明显增加(P<0.01);与模型组比较,低、中、高剂量组主动脉窦病理形态变化改善,泡沫细胞生成减少(P<0.05,P<0.01),主动脉窦F4/80蛋白表达明显减少(P<0.01),且与阿托伐他汀组比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞实验证明:与对照组比较,模型组脂滴面积明显增加(P<0.01),血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、CD36、清道夫受体A1(SRA1)蛋白表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,四妙勇安汤组细胞脂质吸收明显减少(P<0.01);LOX-1、CD36、SRA1蛋白表达减少(P<0.05,P<0.01)。结论 四妙勇安汤通过抑制巨噬细胞中LOX-1、CD36、SRA1分子表达,降低胆固醇吸收,减少巨噬细胞泡沫化,从而改善AS。
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单位天津中医药大学第一附属医院