摘要
目的 探讨原阿片碱对脂多糖(LPS)诱导的肠上皮细胞炎症、凋亡和氧化应激的影响。方法 通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验筛选出5μg/ml的LPS处理NCM460细胞,同时加入不同浓度的原阿片碱(0、5、10、20μM)刺激细胞24 h。通过MTT法和流式细胞术检测NCM460细胞活力和凋亡率。通过Western blot免疫印迹法检测各处理组中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。通过ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。通过ELISA检测抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)和髓过氧化物酶(MPO)的表达水平以及通过流式细胞术检测活性氧(ROS)表达水平,明确原阿片碱对NCM460细胞氧化应激反应的影响。结果 5μg/ml的LPS组的NCM460细胞活力低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。LPS+原阿片碱组NCM460细胞活力、Bcl-2蛋白高于LPS组,且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。LPS+原阿片碱组NCM460细胞的凋亡率、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-6、氧化应激分子SOD、MDA、T-AOC、MPO和ROS的表达水平低于LPS组,且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 原阿片碱可通过降低细胞凋亡、炎症反应及氧化应激反应改善LPS诱导的肠上皮细胞炎性损伤。
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