摘要

目的 为探索胃癌细胞增殖的分子机制,研究多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)和细胞分裂周期5样(裂殖酵母)(CDC5L)基因结合促进胃癌细胞增殖凋亡的影响。方法 GEPIA2数据库预测PTBP1和CDC5L在胃癌细胞中的表达;RT-qPCR和Western blot检测PTBP1和CDC5L的表达水平;GEPIA2数据库预测CDC5L和PTBP1之间的相关性,并通过免疫蛋白沉淀实验检测验证。通过转染,干扰PTBP1和CDC5L的表达。随后,克隆实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;TUNEL荧光染色检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2和caspase3的表达。结果 GEPIA2数据库预测所示PTBP1和CDC5L在胃癌中表达差异有统计学意义(P<0.05),且高表达。与癌旁组织中蛋白表达相比,PTBP1和CDC5L在胃癌组织中表达提高(P<0.01);比正常细胞中蛋白表达相比,PTBP1和CDC5L在胃癌细胞中表达均上调(P<0.01);GEPIA2数据库显示PTBP1与CDC5L具有正向线性相关性;免疫沉淀实验结果表明PTBP1和CDC5L可相互结合。细胞克隆实验表明PTBP1和(或)CDC5L被抑制后,胃癌细胞增殖水平下降(P<0.05);且敲低PTBP1和/或CDC5L后胃癌细胞周期G0/G1期受阻滞(P<0.001)。细胞凋亡水平检测显示,与对照组相比,干扰PTBP1和/或CDC5L后,胃癌细胞凋亡增多(P<0.01);相关凋亡蛋白差异具有统计学变化(Bcl-2,P<0.05;Bac,P<0.01;cleaved-caspase3/caspase3,P<0.05)。结论 PTBP1和CDC5L具有结合关系,敲低PTBP1和CDC5L的表达具有抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡作用。