本发明公开了一种荧光防伪薄膜及其制备方法和应用。本发明的荧光防伪薄膜的组成包括纳米纤维和氮掺杂碳量子点,纳米纤维交织成薄膜状,氮掺杂碳量子点附着在纳米纤维表面。本发明的荧光防伪薄膜的制备方法包括以下步骤:将纳米纤维和氨基酸分散在溶剂中,再进行微波反应,再在水中进行透析,抽滤,即得荧光防伪薄膜。本发明的荧光防伪薄膜具有发光强度高、稳定性好、机械强度高等优点,且其制备过程简单、绿色环保,在荧光防伪技术领域具有广阔的应用前景。