β-半乳糖苷酶全细胞催化制备低聚半乳糖工艺优化

作者：段绪果; 孙晓军; 吴敬

来源：食品与发酵工业, 2014, 40(12): 61-65.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201412013

• β-半乳糖苷酶
• 毕赤酵母
• 全细胞催化剂
• 条件优化
• 低聚半乳糖

β-半乳糖苷酶能以乳糖为底物生产低聚半乳糖。利用前期构建的产β-半乳糖苷酶F441Y重组毕赤酵母为菌种,进行摇瓶发酵并诱导培养。酵母菌体经过离心、洗涤后作为全细胞催化剂用于转化乳糖制备低聚半乳糖。为了提高转化率,首先通过单因素实验,优化了反应的初始p H、温度、乳糖浓度、加酶量和反应时间等因素。在此基础上,采用正交实验进一步优化了反应条件,优化后的最佳条件为:反应初始p H 6.0,反应温度为80℃,乳糖浓度为80%(w/v),加酶量为5 U/m L。在最佳转化条件下,反应24 h,低聚半乳糖的最高转化率为59.9%。与游离酶转化方法相比,该反应体系中的杂蛋白和美拉德反应较少,更有利于低聚半乳糖产品的后续分离。该研究建立的全细胞酶转化方法,具有转化率高、简单易行以及容易操作等优点。

• 单位
  江南大学; 工业生物技术教育部重点实验室; 食品科学与技术国家重点实验室; 生物工程学院