siRNA干扰Gadd45α表达对皮肤鳞状细胞癌A431细胞侵袭和迁移的影响

作者：李小静; 李志锋; 韩昭; 燕霞; 李显平; 刘保国^*; ***^*

来源：中华皮肤科杂志, 2018, 51(06): 447-450.

• 肿瘤, 鳞状细胞
• RNA干扰
• 肿瘤侵润
• 细胞迁移分析
• 生长抑制和DNA损伤诱导45蛋白α

目的探讨靶向沉默生长抑制和DNA损伤诱导45蛋白α(Gadd45α)对皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞株A431侵袭和迁移的影响。方法采用实时荧光定量PCR、Western印迹检测A431和Colon16细胞Gadd45α基因和蛋白的表达, 选取高表达Gadd45α的A431细胞株作为研究对象。将A431细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组:实验组转染Gadd45α-siRNA-1, 阴性对照组转染阴性对照siRNA, 空白对照组不做任何处理。采用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测干预后Gadd45α mRNA和蛋白的表达, Transwell小室法及细胞划痕法检测干预对A431细胞株侵袭及迁移能力的影响。结果 A431细胞高表达Gadd45α基因和蛋白。干预后实验组A431细胞Gadd45α mRNA及蛋白相对表达量分别为0.286 ± 0.013、0.33 ± 0.007, 明显低于阴性对照组组(1.028 ± 0.183、0.87 ± 0.002)以及空白对照组(1.001 ± 0.057、0.86 ± 0.004), 差异均有统计学意义(F值分别为5 893.857、2 763.000, 均P < 0.001)。实验组A431细胞株穿过聚碳酸酯膜的细胞数为66.33 ± 3.79, 明显多于阴性对照组(26.00 ± 4.36)和空白对照组(28.33 ± 4.16), 3组间差异有统计学意义(F= 20.084, P= 0.002)。划痕实验中, 实验组每高倍视野下细胞迁移数为315.33 ± 6.66, 明显多于阴性对照组(154.67 ± 2.08)和空白对照组(130.67 ± 3.51), 3组间差异有统计学意义(F= 1 676.255, P < 0.001)。结论 A431细胞株高表达Gadd45α, 靶向沉默Gadd45α表达能增强A431细胞株的侵袭和迁移能力。

• 单位
  河北工程大学附属医院