摘要

目的 基于氧化应激途径探讨补肾生精调和气血法对卵巢储备功能低下(DOR)大鼠卵巢功能的保护作用。方法 将60只成年雌性SD大鼠随机分为空白组、环磷酰胺组、戊酸雌二醇组及补肾生精调和气血方低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外,其他组均给予环磷酰胺75 mg/kg单次腹腔注射制备DOR模型。造模后,戊酸雌二醇组给予戊酸雌二醇0.105 mg/kg灌胃,补肾生精调和气血方低、中、高剂量组分别给予补肾生精调和气血方8.075 g/kg、16.15 g/kg、32.3 g/kg灌胃,空白组和环磷酰胺组给予等量去离子水灌胃,均每日1次,连续21 d。实验过程中观察大鼠一般情况及动情周期改变;末次灌胃结束后取血,检测血清抗苗勒管激素(AMH)、雌激素(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、总抗氧化能力(T-AOC)水平,苏木素染色观察卵巢形态学改变,Western blot法、免疫组化法检测卵巢组织中血红素氧合酶1 (HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO-1)蛋白表达情况,实时荧光定量PCR法检测卵巢组织中HO-1和NQO-1 mRNA表达情况。结果 与空白组比较,环磷酰胺组大鼠体重增长较慢,动情周期紊乱;血清FSH、LH、MDA水平均明显升高(P均<0.05),血清AMH、SOD、T-AOC水平均明显降低(P均<0.05);卵巢内生长卵泡数量减少,闭锁卵泡数量增多;卵巢组织中HO-1、NQO-1蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),HO-1、NQO-1 mRNA相对表达量变化不明显(P均>0.05)。与环磷酰胺组比较,各药物组大鼠动情周期逐渐恢复;戊酸雌二醇组和补肾生精调和气血方中剂量组大鼠血清FSH、LH、MDA水平均明显降低(P均<0.05),血清E2、SOD、GSH、T-AOC水平均明显升高(P均<0.05);各药物组大鼠卵巢内生长卵泡数量增多,闭锁卵泡数量减少;补肾生精调和气血方高剂量组HO-1蛋白相对表达量、补肾生精调和气血方低剂量组NQO-1蛋白相对表达量及补肾生精调和气血方中、高剂量组HO-1 mRNA相对表达量均明显增高(P均<0.05),且补肾生精调和气血方各组HO-1、NQO-1蛋白相对表达量均明显高于戊酸雌二醇组(P均<0.05)。结论 补肾生精调和气血法可能通过提高DOR大鼠卵巢抗氧化能力,抑制颗粒细胞凋亡,减少卵泡闭锁,从而改善卵巢储备功能,延缓卵巢功能减退。