不同patatin样磷脂酶结构域蛋白3 I148M基因型对肝癌细胞增殖的影响

作者：颜雪梅; 袁淑华; 许晓; 艾鹤英; 梁华^*

来源：中华医学杂志, 2018, 98(34): 2754-2759.

• 脂肪肝, 非酒精性
• HepG2细胞
• 基因型
• patatin样磷脂酶结构域蛋白3
• 细胞增殖

目的探讨含patatin样磷脂酶结构域蛋白3(PNPLA3)野生型148I/I及突变型148M/M对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响及相关机制。方法构建PNPLA3 148I/I及148M/M慢病毒稳定过表达及阴性对照细胞株即过表达PNPLA3野生型148I/I HepG2细胞、过表达PNPLA3突变型148M/M HepG2细胞和阴性病毒对照(NC)HepG2细胞。细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK8)检测不同细胞株的活力, 5-乙炔基-2′脱氧尿苷(EdU)法检测细胞增殖情况, Western印迹检测磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)信号通路的蛋白水平, 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测与增殖相关的PNPLA3代谢产物花生四烯酸(AA)、溶血磷脂酸(LPA), 实时荧光定量PCR检测PNPLA3相关增殖指标前列腺素过氧化物合酶2(PTGS2)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC1α)mRNA表达水平。结果过表达PNPLA3 148M/M组比过表达PNPLA3 148I/I组细胞活力高, 差异有统计学意义[(98.02±1.29)%比(71.51±2.89)%, P<0.001], 与NC相比差异无统计学意义[(98.02±1.29)%比(100±2.61)%, P=0.181]。过表达PNPLA3 148M/M组细胞增殖活性较过表达PNPLA3 148I/I组高, 差异有统计学意义(46.46±1.83比35.96±2.65, P=0.001), 与NC组相比差异无统计学意义(46.46±1.83比46.64±7.33, P=0.965)。过表达PNPLA3 148M/M组较过表达PNPLA3 148I/I组PGC1α mRNA表达水平, 总PI3K、PThr-308蛋白激酶B(PThr-308AKT)、PSer2448-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PSer2448-mTOR)、PGC1α蛋白表达水平增高, 但AA和LPA水平以及PTGS2 mRNA表达水平两组差异无统计学意义。结论 PNPLA3 148M/M细胞增殖作用较PNPLA3 148I/I强。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 广州市番禺区中心医院