基于蛋白免疫印迹的水蛭抗凝活性成分研究

作者：程珊; 汪波; 肖凌; 聂晶^*; 郑健^*

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2019, 21(04): 657-661.

• 宽体金线蛭
• 日本医蛭
• 凝血酶
• Native-PAGE
• 抗凝成分
• Western Blot

目的:建立Native-PAGE结合Western blot检测水蛭活性多肽与凝血酶相互作用产物的方法,探究水蛭有效抗凝成分。方法:本研究分别提取宽体金线蛭、日本医蛭两种水蛭虫体总蛋白及日本医蛭唾液蛋白,用凝血酶滴定法测定其抗凝血酶活性,Western blot检测凝血酶-活性多肽复合体。结果:研究发现两种水蛭Native-PAGE-WB均检测到凝血酶-活性多肽复合体,且SDS-PAGE-WB检测到复合体变性后产生凝血酶条带。结论:建立的Native-PAGE-WB法可有效检出水蛭活性多肽和凝血酶相互作用产物,且发现同水蛭素类似,宽体金线蛭活性抗凝多肽与凝血酶在体外也能形成稳定的蛋白复合体。

• 单位
  中国食品药品检定研究院; 湖北省药品监督检验研究院; 湖北中医药大学