荧光定量环介导逆转录等温扩增技术检测丙型肝炎病毒反应体系的建立

作者：张永乐; 刘寿荣; 杨劲

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2011, (06): 564-566.

• 荧光定量
• 环介导逆转录等温扩增
• 丙型肝炎病毒
• 实时荧光定量PCR Fluorescence quantitation
• Reverse loop-mediated isothermal amplification
• Hepatitis C virus
• Real-time PCR

目的建立一种快速、灵敏、特异性高的方法定量检测丙型肝炎病毒RNA。方法根据丙型肝炎病毒基因5′UTR序列中8个基因区段设计3对特异引物同时加入SYBR GreenⅠ染料在反转录酶和BstDNA聚合酶的作用下60℃等温条件下扩增1 h后根据荧光曲线进行定量。结果 120例经实时荧光定量PCR检测阳性的血清样品进行检测阳性符合率100%。110例健康体检者的血清经两种方法检测均阴性。对卫生部临检中心提供105IU/m1的质控样本采用阴性血清稀释后进行灵敏度的实验,结果显示荧光定量环介导逆转录等温扩增(RT-LAMP)技术可检出10 IU/ml浓度的RNA分子颗粒。结论成功建立了荧光定量环介导逆转录...

• 单位
  浙江省血液中心; 杭州市第六人民医院