勿动蛋白A胞外肽残基1-40修饰神经干细胞促进轴突再生

作者：张弼; 胡利红; 李旭生; 张宇飞; 马俊驰; 袁海峰^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(09).

• 脊髓损伤
• 勿动蛋白A胞外肽残基1-40
• 神经干细胞
• 基因工程

目的构建勿动蛋白A胞外肽残基1-40(NEP1-40)基因工程神经干细胞(NEP1-40-NSCs)并探究其对神经元轴突再生的影响。方法制备NEP1-40-NSCs, 检测目的基因的表达量, 同时鉴定其分化潜能;NEP1-40-NSCs组与神经干细胞(NSCs)组分别与大鼠海马组织神经元共培养后测量各组神经元轴突新增面积, 同时鬼笔环肽染色观察生长锥及丝状伪足结构。多组间比较用单因素方差分析, 两组间比较用t检验。结果 NEP1-40-NSCs组β3-微管蛋白(Tuj-1)、少突胶质细胞转录因子2(Oligo2)及髓鞘碱性蛋白(MBP)所标记的阳性细胞数高于NSCs组(47.001±16.670比30.333±3.480、38.001±14.001比24.000±2.582、16.464±0.813比12.334±0.681, t=4.789、5.422、6.745, P<0.05), 而胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记的阳性细胞数低于NSCs组(22.002±20.331比42.330±3.575, t=5.688, P<0.05)。NEP1-40-NSCs组的轴突新增面积大于NSCs组[(9 096.000±4 292.000) μm2比(4 803.000±541.300) μm2, t=7.929, P<0.05];鬼笔环肽染色结果显示与NSCs组比较, NEP1-40-NSCs组的生长锥面积增宽[(103.000±79.670) μm2比(23.330±8.192) μm2, t=9.725, P<0.05], 伪足数量增多且长度增加[(0.122±0.037) μm比(0.085±0.008) μm, t=4.513, P<0.05]。结论 NEP1-40-NSCs在体外能够促进神经元轴突的延长, 影响生长锥的结构发育, 具有促进脊髓损伤修复的潜力。

• 单位
  宁波市医疗中心李惠利医院; 宁夏医科大学总医院; 宝鸡市中医医院