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摘要
目的大黄素具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤的作用,本文拟通过医学实验以及生物信息学分析方法探讨大黄素对肝癌细胞的作用以及分子机制。方法梯度浓度的大黄素处理肝癌细胞Huh7,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)与蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测miR-429与SOX2的表达以确定大黄素的处理浓度。合成过表达SOX2的质粒、miR-429 inhibitor、miR-429 mimics,然后转染至Huh7细胞,分别通过qPCR与Western blotting验证miR-429与SOX2的表达变化,并通过CCK-8、迁移和侵袭实验观察细胞功能变化。最后根据TargetScan软件预测的结合位点,利用双荧光素报告基因检测证实miR-429与SOX2的结合。结果与对照组相比,大黄素不同浓度(1、10、100μmol/L)处理组均显著促进了miR-429的表达(P<0.05),抑制了SOX2的表达(P<0.05)。过表达SOX2质粒及miR-429 inhibitor均能促进SOX2的表达(P<0.05),同时促进Huh7细胞的增殖、迁移、侵袭;miR-429 mimics则降低了SOX2的表达(P<0.05)及细胞的增殖、迁移、侵袭能力。此外,miR-429可以直接结合SOX2。结论大黄素抑制了肝癌细胞的增殖和侵袭、迁移,具体的机制是通过促进miR-429的表达,进一步抑制SOX2的表达。
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