电针诱导Beagle犬展神经M2型小胶质细胞极化的初步研究

作者：王蕾; 朱保锋; 张毅^*; 王旭东

来源：中华针灸电子杂志, 2018, 7(04): 136-128.

• 电针
• 展神经损伤
• 小神经胶质细胞
• Beagle犬

目的探讨电针诱导是否促进展神经小胶质细胞向M2型极化。方法选用健康6月龄Beagle犬24只,建立Beagle犬展神经损伤模型,按照随机数字表法随机分为假手术组、神经损伤组、电针处理组及AM1241组,每组6只。假手术组:仅暴露分离展神经,术中不进行神经损伤处理,缝合切口皮肤,在电针刺激时进行束缚;损伤组:制作展神经损伤模型,在电针刺激时进行束缚;电针处理组:Beagle犬展神经损伤模型建立后连续2周进行电针刺激; AM1241组:展神经损伤+大麻素2型受体激动剂AM1241,展神经损伤后连续2周给予溶剂3 mL/kg进行腹腔注射,在电针刺激时进行束缚。将4组实验动物干预2周,于第7天、第14天取材进行Western Blot检测展神经小胶质细胞M1特异性标记蛋白诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素1β(IL-1β),M2特异性标记蛋白精氨酸酶-1(Arginase)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平,进一步观察免疫荧光分析Arginase表达的情况,4组之间比较采用Kruskal-Wallis H检验,组内两组间比较用Mann-Whitney U检验。结果 (1)术后第7天4组iNOS表达分别为1. 370、1. 610、0. 190、0. 105。4组iNOS表达比较差异具有统计学意义(χ2=21. 64,P <0. 05),电针处理组和AM1241组iNOS的表达较神经损伤组均降低(Z=-2. 89、-2. 89,P均<0. 05);术后第14天4组iNOS表达分别为1. 430、1. 990、0. 165、0. 150。4组iNOS表达比较差异具有统计学意义(χ2=20. 99,P <0. 05),电针处理组和AM1241组iNOS的表达较神经损伤组均降低(Z=-2. 89、-2. 94,P均<0. 05)。(2)术后第7天,4组IL-1β表达分别为1. 255、1. 575、0. 180、0. 160。4组IL-1β表达比较差异具有统计学意义(χ2=21. 34,P <0. 05),电针处理组和AM1241组IL-1β的表达较神经损伤组均降低(Z=-2. 90、-2. 91,P均<0. 05)。术后第14天4组IL-1β表达分别为1. 245、1. 485、0. 255、0. 185。4组IL-1β表达比较差异具有统计学意义(χ2=21. 69,P <0. 05),电针处理组和AM1241组IL-1β的表达较神经损伤组均降低(Z=-2. 91、-2. 93,P均<0. 05)。(3) 4组均检测到M2特异性标记蛋白(Arginase、BDNF)。其中术后第7天4组Arginase表达分别为0. 090、0. 420、1. 795、1. 820。4组Arginase表达比较差异具有统计学意义(χ2=21. 44,P <0. 05),且电针处理组和AM1241组的Arginase表达均高于神经损伤组(Z=-2. 92、-2. 93,P均<0. 05)。术后第14天4组Arginase表达分别为0. 165、0. 545、1. 850、1. 930。4组Arginase表达比较差异具有统计学意义(χ2=20. 52,P <0. 05),电针处理组和AM1241组的Arginase表达均高于神经损伤组(Z=-2. 90、-2. 91,P均<0. 05)。(4)术后第7天4组BDNF表达分别为0. 075、0. 385、1. 715、1. 770。4组BDNF表达比较差异具有统计学意义(χ2=21. 69,P <0. 05),电针处理组和AM1241组的BDNF表达均高于神经损伤组(Z=-2. 91、-2. 92,P均<0. 05)。术后第14天4组BDNF表达分别为0. 140、0. 485、1. 810、1. 870。4组BDNF表达比较差异具有统计学意义(χ2=21. 72,P <0. 05),电针处理组和AM1241组的BDNF表达均高于神经损伤组(Z=-2. 93、-2. 92,P均<0. 05)。结论电针能够减少Beagle犬展神经M1型小胶质细胞表达,诱导M2型小胶质细胞极化促进损伤神经修复。同时大麻素2型受体激动剂AM1241可以发挥良好的电针协同作用,但AM1241可能不影响小胶质细胞M2型标记蛋白表达的上调。

• 单位
  南通大学