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摘要
目的 探讨环状RNA SNRK(circ SNRK)在缺血-再灌注损伤（IRI）中的作用及机制。方法 构建缺氧-复氧（IRI）细胞模型，检测IRI处理后circ SNRK的表达情况及过表达circ SNRK对细胞增殖和细胞凋亡的影响。分析circ SNRK的作用靶点。将HK2细胞分为空白组（Mock组）、IRI组、对照质粒+IRI组（IRI+NC组）、过表达人circ SNRK+IRI组（IRI+circ SNRK组）、过表达人circ SNRK+IRI+蛋白激酶B(Akt)抑制剂组（IRI+circ SNRK+MK2206组）、对照质粒组（NC组）。检测Mock组、IRI组、IRI+NC组、IRI+circ SNRK组细胞增殖及凋亡情况。进行circ SNRK作用靶点的基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）聚类分析。检测Mock组、IRI组、IRI+NC组、IRI+circ SNRK组细胞CDKN1A、Akt、B细胞淋巴瘤（Bcl）-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-9信使RNA(m RNA)表达水平，p21、Bcl-2、Caspase-9、Akt、p-Akt蛋白表达水平。检测NC组、IRI+NC组、IRI+circ SNRK组、IRI+circ SNRK+MK2206组细胞增殖及凋亡情况。结果 与Mock组比较，IRI组circ SNRK表达水平较低，HK2细胞增殖能力下降，细胞凋亡增多。IRI+circ SNRK组细胞增殖能力较IRI+NC组升高，细胞凋亡较IRI+NC组减少。circ SNRK可通过51个微小RNA(mi RNA)作用于648个靶点。GO富集分析显示，circ SNRK作用靶点主要富集于细胞过程和生物调节等生物学过程，细胞部分、细胞和细胞外部分等细胞成分，以及结合、结合蛋白和酶等分子功能。KEGG聚类分析显示，circ SNRK作用靶点主要富集在癌症信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）-Akt信号通路和癌症mi RNA等相关通路。与Mock组比较，IRI组CDKN1A和Caspase-9m RNA相对表达量较高，mi R-99a-5p RNA表达水平较高，Akt和Bcl-2 mRNA相对表达量较低；与IRI+NC组比较，IRI+circ SNRK组CDKN1A和Caspase-9 mRNA相对表达量较低，Akt和Bcl-2 mRNA相对表达量较高，mi R-99a-5p RNA表达水平较低，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。IRI组p21和Caspase-9蛋白表达较Mock组增多，p-Akt、Akt和Bcl-2蛋白表达较Mock组减少；IRI+circ SNRK组p21和Caspase-9蛋白表达较IRI+NC组减少，p-Akt、Akt和Bcl-2蛋白表达较IRI+NC组增多。circ SNRK和Akt上存在mi R-99a-5p结合位点。与NC组比较，IRI+NC组细胞增殖能力下降；与IRI+NC组比较，IRI+circ SNRK组细胞增殖能力升高；与IRI+circ SNRK组比较，IRI+circ SNRK+MK2206组细胞增殖能力下降（均为P<0.05）。IRI+NC组细胞凋亡水平较NC组高；IRI+circ SNRK组细胞凋亡水平较IRI+NC组低；IRI+circ SNRK+MK2206组细胞凋亡水平较IRI+circ SNRK组高。结论 在IRI条件下，circ SNRK可影响HK2细胞增殖和凋亡，可能是通过Akt通路发挥作用。
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