RNA干涉抑制肺癌细胞DNA甲基转移酶1(DNMT1)的表达

作者：陈日升; 齐连权; 于长明; 付玲; 于婷; 陈薇

来源：军事医学科学院院刊, 2005, (02): 127-131.

• DNA甲基转移酶1(DNMT1)
• 甲基化
• RNA干涉
• RASSF1A

目的:通过抑制肺癌细胞DNA甲基转移酶1(DNMT1)的表达,从而部分恢复抑癌基因的表达。方法:采用RNAi技术来抑制DNMT1的活性。应用体外转录的方法,共合成了5个针对DNMT1不同靶位的siRNA序列,并转染人肺癌细胞NCI H157。采用MSP PCR、COBRA等方法对抑癌基因RASSF1A进行甲基化分析,半定量RT PCR检测DNMT1mRNA的敲降与RASSF1A基因的表达。结果与结论:5个靶位的siRNA序列中有两个靶位能够有效地抑制DNMT1的表达,且呈剂量依赖效应。人肺癌细胞NCI H157中抑癌基因RASSF1A发生了高度甲基化,在抑制DNMT1活性后,RASSF1A基因去甲基化而恢复表达。

• 单位
  军事医学科学院