AZD0530抑制wnt/β-catenin通路延缓青春期大鼠肾间质纤维化的实验研究

作者：王小健^*; 路晓; 刘志龙; 王军伟; 李小亚; 和晓莹; 郭松佳

来源：中华小儿外科杂志, 2023, 44(09).

• 肾
• 纤维化
• 信号通路
• 抑制剂

目的观察AZD0530治疗大鼠肾间质纤维化的实验效果。方法雄性2月龄SD青春期大鼠25只, 分为假手术组(暴露左侧输尿管, 5只)和肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis, RIF)组(结扎左侧输尿管, 20只)。实验1:假手术组和RIF组各5只大鼠, 于术后4周处死, 均取左侧肾脏制作组织学切片、应用Masson染色后计算胶原成分占比, 应用免疫组织化学检测Fyn、α-SMA蛋白表达;应用PCR检测Fyn mRNA、α-SMA mRNA相对表达量;应用Western-blot检测Fyn、α-SMA蛋白表达。实验2:15只RIF组大鼠分为生理盐水(normal saline, NS)组(5只, NS灌胃/d)、5 mg组(5只, AZD0530灌胃5 mg·kg-1·d)、50 mg组(5只, AZD0530灌胃50 mg·kg-1·d), 术后4周处死大鼠, 检测项目同实验1。结果实验1, 同假手术组相比, RIF组肾脏胶原成分占比高[(12.01±2.80)%比(0.79±0.27)%, t=8.91, P<0.001], 免疫组织化学结果显示肾组织Fyn评分高[(4.06±0.37)分比(2.03±0.19)分, t=11.02, P<0.001]、α-SMA评分高[(4.92±0.48)分比(1.88±0.28)分, t=12.23, P<0.001], PCR检测结果显示肾组织Fyn mRNA相对表达量高[(4.64±0.66)倍比(1.00±0.02)倍, t=12.32, P<0.001]、α-SMA mRNA相对表达量高[(5.60±1.36)倍比(0.99±0.01)倍, t=7.600, P<0.001], Western-blot检测结果显示肾组织Fyn表达水平高[(0.26±0.04)比(0.10±0.03), t=7.35, P<0.001]、α-SMA表达水平高[(0.55±0.05)比(0.12±0.02), t=17.49, P<0.001]。实验2, 经AZD0530治疗后, 大鼠肾脏胶原成分占比降低[NS组(12.20±1.56)%, 5 mg组(7.42±1.28)%, 50 mg组(3.48±1.29)%, F=49.93, P<0.001], 免疫组织化学结果显示肾组织Fyn评分无明显改变[NS组(4.22±0.67)分, 5 mg组(4.17±0.63)分, 50 mg组(4.00±0.53)分, F=0.18, P=0.84]、α-SMA评分降低[NS组(7.00±0.41)分, 5 mg组(3.22±0.52)分, 50 mg组(1.73±0.32)分, F=206.7, P<0.001], PCR检测结果显示肾组织Fyn mRNA相对表达量无明显变化[NS组(1.01±0.05)倍, 5 mg组(1.00±0.07)倍, 50 mg组(1.03±0.06)倍, F=0.14, P=0.87]、α-SMA相对表达量降低[NS组(1.00±0.02)倍, 5 mg组(0.50±0.10)倍, 50 mg组(0.24±0.04)倍, F=170.7, P<0.001], Western-blot检测结果显示肾组织Fyn表达水平无明显变化[NS组(0.36±0.04), 5 mg组(0.37±0.07), 50 mg组(0.32±0.06), F=0.78, P=0.48], α-SMA表达水平降低[NS组(1.27±0.15), 5 mg组(0.70±0.08), 50 mg组(0.15±0.04), F=149.6, P<0.001], 均以50 mg组为著。结论 RIF大鼠肾脏组织中wnt/β-catenin通路过度激活。AZD0530可通过阻止Fyn对β-catenin的磷酸化过程抑制wnt通路的激活, 最终缓解肾间质的纤维化。

• 单位
  山西省人民医院