羽扇豆醇抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞自噬的实验研究

作者：金丽杰; 刘欢; 刘莎莎; 成桃; 韦燕飞^*

来源：中药材, 2022, 45(02): 422-426.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2022.02.030

• 羽扇豆醇
• 肝癌细胞
• 自噬
• ERK信号通路

目的：观察羽扇豆醇对肝癌HepG_2、Huh-7细胞增殖、自噬的影响。方法：体外培养肝癌HepG_2、Huh-7细胞，分为溶剂对照组及羽扇豆醇低(20μmol/L)、中(40μmol/L)、高(80μmol/L)浓度组。CCK-8、平板克隆实验检测不同浓度羽扇豆醇对肝癌细胞增殖和克隆形成能力的影响；电子透射显微镜观察羽扇豆醇作用肝癌细胞后细胞内自噬小体分布情况；荧光显微镜观察腺病毒RFP-GFP-LC3B转染后肝癌细胞内自噬流；Western Blot实验检测肝癌细胞内自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ、P62、Beclin1及ERK信号通路相关蛋白P38、p-P38、ERK、p-ERK表达的变化。结果：CCK-8实验结果显示，与对照组比较，30μmol/L羽扇豆醇即可抑制肝癌细胞的增殖(P<0.01);在羽扇豆醇作用两种肝癌细胞24 h后光学显微镜下可见细胞漂浮、变圆，Huh-7细胞梭形更加锐利；克隆形成实验表明，80μmol/L羽扇豆醇可抑制肝癌细胞克隆形成能力(P<0.01);腺病毒RFP-GFP-LC3B转染实验显示，80μmol/L羽扇豆醇可诱导细胞自噬流；透射电子显微镜结果显示80μmol/L羽扇豆醇处理后肝癌细胞内自噬小体增多；Western Blot结果显示羽扇豆醇可显著上调肝癌细胞内LC3Ⅱ、P62、p-ERK蛋白表达(P<0.05或P<0.01),而对Beclin1、P38、p-P38、ERK蛋白表达无显著影响。结论：羽扇豆醇能抑制肝癌细胞增殖并诱导其自噬，其机制可能与活化ERK信号通路p-ERK蛋白表达有关。

• 单位
  广西中医药大学; 基础医学院; 广西中医药大学第一附属医院