本发明公开了一种污泥减量技术中颤蚓的相对定量方法及其应用。本发明提供的颤蚓的相对定量方法可通过“样品混合干燥+荧光定量PCR+标线公式计算”的简便操作,快速获得不同组别待测物样品中的颤蚓DNA拷贝数,进而通过直接对比拷贝数大小判断不同组别待测物中颤蚓生物量的相对多寡,解决了目前使用计数、称量等常规方法难以完成颤蚓定量工作的问题,可实现对比评价不同污泥减量反应器的污泥减量效果,或者判断单一污泥减量反应器中颤蚓生长状态的目的,具有广阔的应用前景。