白菜BcMAF2基因克隆及功能验证

作者：吴小婷; 邵帅旭; 任海波; 李林; 侯喜林; 刘同坤^*

来源：西北植物学报, 2018, 38(09): 1571-1577.

• 白菜
• BcMAF2
• 开花
• 亚细胞定位
• 转基因

为了揭示白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis Makino)开花调控转录因子(MADS AFFECTING FLOWERING 2)MAF2在开花过程中的作用,该研究通过同源克隆的方法获得BcMAF2基因的全长序列。结果表明:(1)BcMAF2基因含有1个长度为588bp开放阅读框,编码196个氨基酸;将BcMAF2蛋白氨基酸序列与其他物种MAF2氨基酸比较表明,BcMAF2基因与其他物种中该基因具有高度保守的结构域。(2)将BcMAF2与YFP和HA标签融合,构建亚细胞定位载体pEarleyGate101-BcMAF2-YFP-HA,采用农杆菌介导法将其瞬时表达于本氏烟草(Nicotiana tabacum)叶片中,激光共聚焦显微镜观察发现BcMAF2蛋白定位于细胞核中,表明BcMAF2符合作为转录因子的功能。(3)将BcMAF2基因遗传转化拟南芥中进行功能验证,通过蛋白印迹试验获得5个过表达株系,且在选取的蛋白表达量较高的第8、10株拟南芥中均表现出明显延迟其抽薹开花表型。研究推测BcMAF2基因可能参与植物开花的春化途径。

• 单位
  作物遗传与种质创新国家重点实验室; 农业部; 南京农业大学