摘要
目的观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(5-aminolevulinic photodynamic therapy,ALA-PDT)预处理对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐射后体外培养的人皮肤成纤维细胞增殖以及凋亡的影响。方法采用低剂量ALA-PDT预处理人皮肤成纤维细胞,随后予60 m J/cm2UVB急性辐射,倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力,膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡率,JC-1试剂盒检测细胞的线粒体膜电位变化,Western blot检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine-requiring aspartate protease 3,Caspase-3)、BCL2-associated X的蛋白质(BCL2-associated X,Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的表达。结果与UVB组比较,倒置显微镜下观察到ALA-PDT-UVB组的细胞碎片更少,细胞排列更为紧密; CCK-8结果提示ALA-PDT-UVB组细胞增殖活性更强; Annexin V/PI双染法及线粒体膜电位结果显示ALA-PDT-UVB组凋亡更少; Western blot结果显示ALA-PDT-UVB组Caspase-3、Bcl-2表达水平增高,Bax表达水平降低。结论低剂量ALA-PDT预处理能显著逆转UVB急性辐射引起的细胞凋亡,并影响凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达,从而发挥光保护作用。
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单位江苏省人民医院; 南通市第一人民医院