PCDGF反义RNA真核表达载体的构建、转染及其对卵巢癌细胞增殖能力的抑制效应

作者：刘玉兰; 廖国宁; 韩志强; 马湘一; 陈刚; 高庆蕾; 奚玲; 张阿丽; 卢运萍; 马丁

来源：现代妇产科进展, 2005, 14(2): 104-107.

DOI：10.3969/j.issn.1004-7379.2005.02.007

• 卵巢肿瘤
• 畸胎瘤源性生长因子
• 真核表达载体
• 反义核酸

目的:检测特异性封闭高度恶性人卵巢癌细胞株Sw626、A2780中畸胎瘤源性生长因子(PC-cell-devived Growth Factor,PCDGF)的表达,并观察其对增殖能力的抑制效应.方法:用RT-PCR技术扩增PCDGF基因cDNA保守序列,经pGEM-T Easy载体克隆后双酶切,反向插入哺乳动物真核表达载体pcDNA3.1(+)构建反义PCDGF核酸载体.并通过脂质体转染法转染人卵巢癌细胞株Sw626、A2780,用RT-PCR和Western blot技术检测转染前后PCDGF mRNA和蛋白的表达,MTT实验检测其增殖能力的变化.结果:PCDGF反义核酸载体转染株的mRNA和蛋白水平明显低于对照组,Sw626的抑制率分别为50%、72%;A2780分别为53%、70%.同时增殖能力亦明显降低,其抑制率Sw626及A2780分别为71%、73%.结论:PCDGF反义核酸在高度恶性人卵巢癌细胞株Sw626及A2780中起了特异性封闭作用.为进一步研究PCDGF的分子生物学特性、致瘤机理及今后利用反义PCDGF核酸载体治疗卵巢癌提供了实验和理论模型.

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院