流式细胞术鉴定结核分枝杆菌利福平异质性耐药可行性分析

作者：李华; 王伟亮; 谢贝; 杨瑜; 孟繁荣; 王楠; 刘志辉; 张言斌^*

来源：检验医学, 2022, 37(06): 577-582.

• 流式细胞术
• 结核分枝杆菌
• 利福平异质性耐药
• 荧光素双醋酸酯

目的 探讨流式细胞术（FCM）检测结核分枝杆菌（MTB）利福平（RFP）异质性耐药的可行性。方法 将MTB临床分离株分别用12.5、25、50和100μg/m L RFP处理3、7和10 d后，用荧光素双醋酸酯（FDA）染色，采用FCM检测其平均荧光强度（MFI），计算敏感指数（实验管MFI/对照管MFI），并进行差异性分析。确定不影响RFP耐药MTB临床分离株生长、但抑制RFP敏感MTB临床分离株生长的RFP处理浓度和时间。将30株RFP敏感MTB临床分离株和30株RFP耐药MTB临床分离株菌液混合，得到RFP耐药MTB所占比例分别为0%、25%、50%、75%和100%的RFP异质性耐药MTB菌液，按照确定的RFP浓度和时间处理，计算FDA染色后的敏感指数。采用受试者工作特征（ROC）曲线评估不同比例RFP异质性耐药MTB菌液的敏感指数界值和检测性能。结果 基于FDA的FCM检测MTB RFP异质性耐药的较优RFP处理浓度为50μg/mL，作用时间为10 d；用50μg/m L RFP处理MTB 10 d时，基于FDA的FCM鉴别含0%、25%和100%的RFP异质性耐药MTB菌液样本的敏感指数界值分别为0.48和0.83，敏感性分别为96.2%和86.7%，特异性分别为96.7%和83.3%；处理14 d时，该方法鉴别含0%、25%和100%RFP异质性耐药MTB菌液样本的敏感指数界值分别为0.37和0.77，敏感性分别为96.7%和96.7%，特异性分别为93.3%和86.7%。结论 FCM在MTB异质性耐药检测中具有较高的应用价值。

• 单位
  广州市胸科医院; 佛山市第四人民医院