p53基因突变子175 H、248 W和273 H的定点突变及表达载体的构建

作者：刘扬; 赵银龙; 刘晓冬; 马淑梅; 龚守良; 刘树铮

来源：吉林大学学报(医学版), 2006, 32(4): 543-546.

DOI：10.3969/j.issn.1671-587X.2006.04.001

• 基因
• p53
• 突变子
• 定点突变
• 遗传载体
• 聚合酶链反应/方法

目的:定点诱变合成p53基因突变子进而构建表达载体.方法:以野生型p53基因为模板,采用PCR体外定点突变技术,设计2对引物,将突变位点设计在引物上,通过重叠延伸法2次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pcDNA3.1载体中.结果:在预期位点已经发生突变,p53基因第175位密码子由精氨酸(cgc)突变为组氨酸(cac),第248位密码子由精氨酸(cgg)突变为色氨酸(tgg),第273位密码子由精氨酸(cgt)突变为组氨酸(cat).p53基因突变子表达载体成功构建.结论:PCR技术诱导定点突变准确、高效.基因突变体的成功构建,为进一步研究该突变位点奠定了基础.

• 单位
  吉林大学; 公共卫生学院