慢病毒介导的MFN2高表达对肾癌细胞增殖的影响

作者：黄耿; 叶志华; 姜卫东; 毛青; 桂定文^*

来源：中华生物医学工程杂志, 2017, (04): 275-278.

• 线粒体融合蛋白2
• 肾肿瘤
• 细胞周期
• 细胞增殖

目的 探讨线粒体融合蛋白2 (MFN2)对肾癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。方法 将含有MFN2编码序列的慢病毒载体(Lenti-MFN2)感染肾癌细胞株ACHN和A498(实验组),对照组为绿色荧光蛋白基因的慢病毒(Lenti-GFP)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测转染后细胞中MFN2 mRNA及蛋白的表达及Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平,流式细胞仪检测转染细胞周期。MTS法和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力的变化。结果 对照组与实验组ACHN细胞中MFN2 mRNA的表达分别为1.04±0.29和4.11±0.78 (P<0.001),A498细胞中MFN2 mRNA的表达分别为1.02±0.24和4.84±1.49 (P=0.002)。实验组MFN2蛋白表达显著上升,Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平显著降低,细胞周期明显抑制,肾癌细胞活力和增殖能力显著下降。结论 MFN2可能通过抑制肾癌细胞中Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平,抑制细胞周期的进展,导致肾癌细胞活力和增殖能力下降。

• 单位
  黄石市中心医院; 湖北理工学院