高迁移率族蛋白B1调控放疗残存胰腺癌细胞的干性获得

作者：宋廉; 张雅宁; 陈雪莲; 朱丽; 石卉; 王鸣; 朱海涛; 张礼荣; 王冬青

来源：江苏大学学报(医学版), 2017, 27(03): 185-189.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y170031

• 放疗
• 高迁移率族蛋白B1
• 胰腺癌
• CD133

目的:研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对放疗后残存胰腺癌细胞的干性转化作用。方法:酶联免疫吸附实验(ELISA)检测在不同放疗剂量下(0、4、8、10、12 Gy)胰腺癌SW1990细胞上清液中HMGB1的含量;通过不同剂量(0、4、6、8、10 Gy)放疗后,流式细胞术检测残存SW1990细胞获得CD133+细胞的比例;获取10 Gy放疗剂量下SW1990细胞的上清液,然后将8 Gy放疗后残存SW1990细胞分成4组:PBS组、上清液+EP(ethyl pyruvate,丙酮酸乙酯,为胞外HMGB1特异性抑制剂)组、上清液组、HMGB1(100 ng/mL)组,流式细胞术检测各组细胞CD133+细胞的比例,同时蛋白质印迹实验检测干性标志分子SOX2和OCT4蛋白表达。结果:ELISA结果显示,胰腺癌SW1990细胞上清液中HMGB1的浓度在10 Gy放疗剂量时最大(217.3±34.97)ng/mL。流式细胞术检测结果显示,在8 Gy放疗后SW1990细胞中CD133+细胞比例最大(22.63±0.74)%。同时流式细胞术检测结果显示,上清液+EP组、上清液组、HMGB1(100 ng/mL)组中CD133+细胞相对于PBS组的比值分别是2.2±0.11、3.2±0.19和6.4±0.32(F=143.4,P<0.01)。蛋白质印迹结果显示,上清液组与HMGB1(100 ng/mL)组中干性相关蛋白SOX2和OCT4的表达明显上调(P<0.01)。结论:放疗后胰腺癌SW1990上清液中存在HMGB1,并且HMGB1会调控残存SW1990细胞干性的获得。

• 单位
  江苏大学附属医院; 中山大学公共卫生学院