尼帕病毒融合蛋白的真核表达及其特异性血清的制备

作者：刘渝娇; 李耀辉; 张冠英; 范鹏飞; 迟象阳; 房婷; 刘树玲; 陈旖; 宋小红; 于长明^*

来源：生物技术通讯, 2019, 30(05): 614-701.

• 尼帕病毒
• 融合蛋白
• 特异性血清
• 真核表达

目的:用真核细胞表达可溶性尼帕病毒融合蛋白(sF),通过免疫小鼠获得抗F蛋白的特异性血清。方法:设计构建重组质粒pcDNA-sF,在哺乳动物表达系统中进行表达,通过Strep柱亲和层析纯化目的蛋白,Western印迹检测目的蛋白,免疫小鼠后制备抗F蛋白的特异性血清,并通过ELISA鉴定抗血清的结合活性。结果:尼帕病毒F蛋白在哺乳动物细胞中获得可溶性表达,纯化得到的目的蛋白大小正确,胰蛋白酶切鉴定其具有与天然蛋白相似的切割产物;制备的抗血清能特异性结合目的蛋白。结论:获得了可溶性尼帕病毒融合蛋白及高效价抗F蛋白的特异性血清,可用于尼帕病毒疫苗评价、特异性抗体筛选等相关研究。