Rab39A多克隆抗体的制备与鉴定

作者：马琳琳; 张明; 杨婷; 王卫杰; 王团老

来源：厦门大学学报(自然科学版), 2013, (01): 116-121.

• Rab39A
• 原核表达
• 多克隆抗体 Rab39A
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody

制备抗人Rab39A多克隆抗体并进行纯化检测,以用于Rab39A功能的研究.选取免疫原性强且特异性高的羧基端42个氨基酸(176～217aa)作为目的片段.PCR法扩增并构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Rab39C42.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化GST-Rab39C42融合蛋白,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.然后以亲和层析法纯化抗体,利用Western blot和免疫荧光检测抗体的特异性.结果表明,构建的原核表达载体经IPTG诱导后高效表达GST-Rab39C42蛋白,纯化后抗体质量浓度为1μg/μL;Western blot实验显示,抗体可以识别外源Rab39...

• 单位
  厦门大学