表达猪细小病毒VP_2基因的重组伪狂犬病毒的构建及其生物学特征研究

作者：吕建强; 陈焕春; 赵俊龙; 方六荣; 何启盖; 熊符

来源：病毒学报, 2004, (02): 133-137.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001615

• 伪狂犬病毒
• 猪细小病毒
• VP2基因
• TK-/gG-/VP 2株 pseudorabies virus
• porcine parvovirus
• VP_2 gene
• TK~ -/gG~ -/VP~ _2 strain

根据Bergeron等报道的猪细小病毒(PPV)基因组,设计一对包含VP2全基因的PCR引物,上下游均引入一个BamHⅠ位点,扩增得到VP2基因后,将其插入到pUSK载体中,构建了转移载体pUSK VP2。采用脂质体介导的转染方法,将伪狂犬病毒TK-/gG-/LacZ+株的基因组DNA与pUSK VP2共转染PK 15细胞,待细胞病变后收集病毒液,在空斑纯化的同时,利用检测PPVVP2基因和LacZ基因的PCR方法筛选重组病毒TK-/gG-/VP+2株,Southernblotting、SDS PAGE、Westernblotting和电镜观察鉴定重组病毒,并在不同细胞上测定重组病毒的增殖滴度...

• 单位
  农业微生物学国家重点实验室