葛根芩连汤对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织Scd1基因甲基化与表达的影响及甲基化与生理生化指标相关性分析

作者：彭淑红; 龚淑芳; 陈永强; **成; 曾伟红; 曾治君; 徐国良; 刘欣宜; 朱卫丰^*; 姚鹏程^*

来源：中国中药杂志, 2022, 47(12): 3328-3338.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20211126.401

• 葛根芩连汤
• 胰岛素抵抗
• 硬脂酰辅酶A去饱和酶
• DNA甲基化

该研究旨在探讨葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction, GQD)对高脂饲料诱导的胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)大鼠脂肪组织硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl CoA desaturase, SCD)基因的甲基化和mRNA水平的作用及甲基化与生理生化指标的相关性。实验分为7组：空白组(C),胰岛素抵抗模型组(IR),GQD低、中、高剂量组(GQDL、GQDM、GQDH;1.65、4.95、14.85 g·kg-1),罗格列酮组(rosiglitazone, RGN;5 mg·kg-1),辛伐他汀组(simvastatin, SVT;10 mg·kg-1)。取大鼠附睾脂肪组织，用亚硫酸氢盐测序PCR法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测Scd1基因2个片段的所有胞嘧啶甲基化水平：片段1[Scd1-1,位于CG海岸(shores)]和片段2[Scd1-2,位于CG岛，包含转录起始位点(transcription start site, TSS)]。用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q-PCR)法测定Scd1 mRNA水平；并采用Spearman相关系数分析所扩增片段C甲基化与基因表达量及大鼠生理生化指标之间的相关性。结果表明，GQDM能显著逆转高脂饲料引起的Scd1-2片段TSS上游CG7甲基化的增加；GQDL能显著逆转高脂饲料引起的Scd1-2片段TSS下游总CG甲基化的降低。各GQD组未显著改善高脂饲料引起的Scd1 mRNA水平降低。位于CG海岸区域的Scd1-1的总CG、CG5、CT11甲基化与血清甘油三酯(triglyceride, TG)水平均呈显著负相关，与Scd1 mRNA水平呈正相关；位于Scd1-2 TSS上游片段多个C位点的甲基化与生理生化指标呈正相关；Scd1-2 TSS下游片段多个CG位点甲基化与生理生化功能指标呈负相关，下游片段多个CH位点甲基化与生理生化功能指标呈正相关。该研究表明，GQD可能通过调节Scd1基因CG岛区TSS上游CG7以及TSS下游总CG位点发挥一定的药效作用；Scd1基因的CG海岸区域总CG、CG5、CT11位点甲基化可能是调节Scd1 mRNA水平进而影响血清TG水平的重要靶点。

• 单位
  江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心; 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室; 江西省中医病因生物学重点实验室; 江西中医药大学中药资源与民族药研究中心; 江西中医药大学; 江西中医药大学药学院