p53对低剂量UVB诱导的MEF细胞辐射损伤中miR-365表达的影响

作者：王建宇; 黄海波; 张燕; 侯狮峰; 张万峰; 刘**^*

来源：河南预防医学杂志, 2019, 30(04): 267-271.

DOI：10.13515/j.cnki.hnjpm.1006-8414.2019.04.007

• UVB
• miR-365
• p53
• 细胞周期

目的探讨低剂量中波紫外线UVB造成MEF损伤过程中,p53对MEF细胞miR-365表达的影响。方法以MEF细胞为研究对象,分为野生型小鼠胚胎成纤维细胞组(MEFP53+/+组),p53缺失的小鼠胚胎成纤维细胞组(MEFP53-/-组),CCK-8法检测低剂量UVB(30 J/m2)照射后3、6、12、18、24 h细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期G2/M期比例变化,蛋白质印迹法检测两种细胞p53蛋白表达量,实时荧光定量PCR检测miR-365的表达。结果 UVB照射后两组细胞存活率存下降;而两组细胞在12、18、24、36 h的存活率相比差异有统计学意义(t值分别为2.4、3.1、3.2、2.8,P值均<0.05);MEFP53+/+细胞在照射后6、12、18、24 h的G2/M期细胞比例上升,与0 h组相比差异均有统计学意义(t值分别为2.1、2.3、2.5、2.8,P值均<0.05);p53在MEFP53-/-细胞中几乎不表达;UVB照射后,MEFP53-/-细胞中miR-365的mRNA在6、12、18、24、36 h显著下降(t值分别为2.0、3.2、3.3、2.9、2.8, P值均<0.05),而MEFP53+/+细胞中只有18 h显著下降(t=4.2,P<0.05)。12、18、24、36 h四个时间点,两组细胞之间miR-365差异有统计学意义(t值分别为2.2、2.6、2.4、2.3,P值均<0.05)。结论 p53可能通过调控miR-365参与低剂量UVB引起的MEF细胞G2/M期阻滞。