摘要

为了建立一种快速、有效鉴定谷子粒黑穗病菌(Ustilago crameri)的分子检测方法,使谷子粒黑穗病得到有效的监测和防治,采用真菌通用引物ITS1/ITS4对谷子粒黑穗病菌ITS序列进行扩增,扩增产物测序后,依据粒黑穗病菌序列设计合成了1对引物,分别以谷子粒黑穗病菌DNA、谷子白发病菌DNA、谷瘟病菌DNA、玉米黑粉菌DNA及谷子叶片基因组DNA作为模板进行PCR扩增。结果表明,仅谷子粒黑穗病菌DNA作模板时有1条特异性扩增条带,且检测的灵敏度可达10 pg/μL,其他材料均未出现扩增条带;将建立的PCR技术用于田间植株检测,能特异性检出谷子穗梗及旗叶中谷子粒黑穗病菌的存在;不同品种谷子植株中的病菌检出率与田间发病率数据基本一致,说明所用引物和PCR检测体系在鉴定粒黑穗病菌感染和植株抗病性方面具有较高的特异性。研究建立的谷子粒黑穗病菌PCR检测体系具有快速、准确、特异性和实用性强等特点,可为谷子粒黑穗病的监测和有效防治提供技术支持。