阿霉素体外抗细粒棘球蚴原头节作用研究

作者：田春艳; 陈蓓; 卢帅; 文丽梅; 赵军; 郑璇; 库尔班泥沙·阿马洪; 高旖; 王建华^*

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(05): 571-582.

• 阿霉素
• 细粒棘球蚴原头节
• DNA损伤
• 共济失调毛细血管扩张症突变激酶
• p53
• Topo2a

目的研究阿霉素(Dox)对细粒棘球蚴原头节的体外抑制作用。方法 4 800个原头节随机分为空白对照组、 1%DMSO组、 Dox组(25、 50、 100、 200、 400、 600μmol/L),每组200个原头节,设3个平行组,体外干预24 h。伊红拒染实验检测Dox干预后原头节活力,统计存活率。扫描电镜观察Dox干预后原头节表面超微结构变化。单细胞凝胶电泳实验检测Dox干预后原头节DNA损伤程度。实时荧光定量PCR (qRTPCR)检测Dox干预后DNA损伤相关基因共济失调毛细血管扩张症突变激酶(ATM)、 p53、 DNA拓扑异构酶2A (Topo2a)的mRNA表达水平。结果伊红拒染实验结果显示,空白对照组、 1%DMSO组、 25、 50、 100、 200、 400、600μmol/L Dox组细粒棘球蚴原头节的存活率分别为(99.0±0.5)%、(98.6±0.3)%、(96.0±1.4)%、(80.3±4.8)%、(75.6±6.2)%、(53.2±3.0)%、(26.4±8.1)%和0, IC50为(267.9±7.1)μmol/L。与空白对照组相比,1%DMSO组、 25μmol/L Dox组原头节存活率差异无统计学意义(P> 0.05), 50、 100、 200、400、 600μmol/L Dox组原头节存活率差异有统计学意义(P <0.01)。扫描电镜结果显示,空白对照组、 1%DMSO组原头节表面光滑,头节呈球形或椭圆形,顶突完整,微毛清晰可见;400μmol/L Dox组原头节吸盘变形,体部塌陷严重,顶突轻微变形,微毛明显脱落,虫体表层发生皱缩。单细胞凝胶电泳实验结果显示,100μmol/L Dox组原头节出现拖尾现象,彗星尾距(OTM)为16.6±1.7,与空白对照组(0.1±0.0)相比,差异有统计学意义(P <0.01)。qRTPCR结果显示,1%DMSO组原头节ATM、 p53和Topo2a mRNA相对表达量分别为1.0±0.1、 1.1±0.1、 1.3±0.9,与空白对照组(1.0±0.1、 1.0±0.4、 1.0±0.1)相比,差异无统计学意义(P> 0.05)。100μmol/L Dox组原头节ATM、 p53和Topo2a mRNA相对表达量分别为38.6±3.5、 10.0±2.5、 54.0±0.8,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P <0.05)。结论Dox具有体外抗细粒棘球蚴原头节作用,可引起虫体DNA损伤,可能与ATM、 p53、Topo2a的mRNA相对表达量变化相关。

• 单位
  新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院