干扰FSCN1基因表达对前列腺癌细胞凋亡、活性氧水平影响的研究

作者：邓毕华^*; 陈晓峰

来源：中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2020, 10(01): 1-6.

• 前列腺癌
• FSCN1基因
• ROS水平
• 凋亡
• NF-κB信号通路

目的探讨干扰FSCN1基因表达对前列腺癌细胞凋亡、活性氧 (ROS)水平影响及机制。方法以正常前列腺上皮细胞RWPE-1为对照细胞,通过RT-PCR及Western blot检测前列腺癌LNCaP、DU145和PC-3细胞中FSCN1 mRNA及蛋白表达;以LipofectamineTM 2000为载体,DU145细胞分为si-FSCN1组 (靶向抑制FSCN1的小干扰RNAs转染DU145细胞)、阴性对照组 (随机序列转染DU145细胞)及空白对照组 (未转染的细胞),siRNA转染48 h,Western blot检测FSCN1、PCNA、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα和p-IKKα的蛋白表达。CCK8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率及ROS水平。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。结果与RWPE-1细胞比较,LNCaP、DU145和PC-3细胞中FSCN1 mRNA (1比 2.561±0.189、7.183±0.882、4.796±0.567、4.796±0.567)及蛋白表达 (0.053±0.007比0.217±0.013、0.654±0.058、0.316±0.035)均升高,差异具有统计学意义 (P均 < 0.05)。与阴性对照组比较,si-FSCN1组FSCN1表达 (0.473±0.052比0.086±0.010)降低,差异具有统计学意义 (P均 < 0.05)。与si-FSCN1组比较,空白对照组、阴性对照组细胞活力 (0.302±0.033比0.787±0.069、0.764±0.063)均升高,凋亡率 (24.54%±1.47%比3.04%±0.36%、3.28%±0.40%)和ROS相对荧光强度 (90.04±5.73比47.88±3.62、49.62±4.11)均降低,差异具有统计学意义 (P均 < 0.05)。与si-FSCN1组比较,空白对照组、阴性对照组PCNA (0.255±0.032比0.654±0.062、0.631±0.058)、NF-κB p65 (0.092±0.011比0.296±0.032、0.318±0.037)、p-NF-κB p65 (0.042±0.008比0.155±0.018、0.151±0.016)、IKKα (0.112±0.01比0.172±0.020、0.192±0.023)和p-IKKα的蛋白表达 (0.051±0.005比0.102±0.011、0.091±0.009)均升高,Cleaved caspase3蛋白表达 (0.206±0.018比0.074±0.009、0.085±0.010)均降低,差异具有统计学意义 (P均 < 0.05)。阴性对照组与空白对照组细胞活力、凋亡率、ROS水平及FSCN1、PCNA、Cleaved caspase3、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IKKα和p-IKKα的蛋白表达差异均无统计学意义(P > 0.05)。结论干扰FSCN1基因表达可降低前列腺癌细胞活力及诱导凋亡,机制可能与ROS水平升高及NF-κB信号下调有关。

• 单位
  郴州市第一人民医院