枣疯病植原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：韩剑; 罗明; 徐金虹; 王同仁; 张祥林

来源：植物保护, 2014, 40(05): 111-116.

• 枣疯病植原体
• TaqMan探针
• 实时荧光定量PCR
• 检测

根据枣疯病植原体16SrDNA基因保守区域设计、合成特异性引物和TaqMan探针,以构建的重组质粒作为阳性标准品,建立并优化了对枣疯病植原体的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。对优化后的方法进行灵敏度、特异性及稳定性评价,制作了标准曲线。结果显示,制作的标准曲线有极好的线性关系,相关系数(r2)达到0.998,建立的实时荧光定量PCR检测方法能够特异性地检测枣疯病植原体,能检测到60拷贝的质粒DNA。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法灵敏度、特异性、重复性好,不仅能够实现对枣疯病植原体的快速检测,而且为实现从病原定量水平上对枣疯病病情分级奠定了基础。

• 单位
  新疆出入境检验检疫局; 新疆农业大学