摘要
目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录本2(CCAT2)在结肠癌细胞系中的表达及对细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测结肠癌细胞系HCT116、SW620、LOVO、HT29与正常结肠上皮细胞系NCM460中lncRNA CCAT2的表达。将结肠癌细胞系SW620分成CCAT2-siRNA组、Control-siRNA组及Mock组,CCAT2-siRNA组和Control-siRNA组经LipofectamineTM 2000分别转染CCAT2-siRNA及Control-siRNA,Mock组以PBST作对照。MTT实验和流式细胞术分别测定增殖和凋亡能力,Western blot测定p53、裂解型聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白的表达。结果:lncRNA CCAT2在结肠癌细胞系LOVO、HT29、HCT116、SW620中均比正常结肠上皮细胞系NCM460表达水平升高(P<0.05)。MTT示:转染后0 h、24 h、48 h,CCAT2-siRNA组与Control-siRNA组OD490 nm值差异无统计学意义(P>0.05)。转染后72 h、96 h,CCAT2-siRNA组OD490 nm值低于Control-siRNA组(P<0.05)。CCAT2-siRNA组细胞凋亡率高于Control-siRNA组(P<0.01)。与Control-siRNA组相比,CCAT2-siRNA组p53、裂解型PARP表达上调,Bcl-2蛋白表达下调。结论:lncRNA CCAT2在结肠癌细胞系中高表达,敲低lncRNA CCAT2表达可抑制结肠癌细胞增殖,并诱导凋亡,其机制可能与p53、裂解型PARP表达上调,Bcl-2蛋白表达下调有关。
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单位武汉市普仁医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院