睾酮固相放射免疫分析方法的建立

作者：袁聪颖

来源：标记免疫分析与临床, 2018, 25(05): 745-749.

• 睾酮
• 液相放射免疫分析
• 固相包被管
• 固相放射免疫分析

目的建立一种睾酮固相放射免疫分析方法,实现睾酮液相放射免疫分析药盒的固相包被管分离。方法利用本公司专利技术纯化出亲和纯驴抗兔抗体,将其包被于聚苯乙烯试管上,兔抗-睾酮抗体能与驴抗兔抗体结合而被间接包被上,从而制备出睾酮抗体包被管,再采用标准抗原与标记抗原竞争包被在聚苯乙烯试管上定量抗体的技术思路,建立睾酮固相放射免疫分析方法。结果睾酮抗体包被管中亲和纯驴抗兔抗体包被浓度为20μg/m L,兔抗-睾酮抗体包被滴度为1∶5万;本方法的反应条件为37℃温育1h,测量范围为0.120 ng/m L,灵敏度为0.02 ng/m L,批内变异为4.37%6.84%,批间变异为6.31%9.03%,回收率为93.6%104.1%,稀释实验测定值与理论值呈线性相关,相关系数为r=0.999;与合格睾酮液相放射免疫分析药盒的相关性方程为Y=1.05X+0.01,相关系数r=0.982;睾酮抗体包被管、125I-睾酮标记物以及睾酮标准品在37℃存放1周稳定性良好。结论本方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。

• 单位
  北京北方生物技术研究所