摘要
目的探讨内皮素3(endothelin 3,EDN3)基因对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法实时荧光定量PCR检测EDN3 mRNA在人结直肠癌组织及对应癌旁组织中的表达情况,半定量PCR检测EDN3及内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB)mRNA在结直肠癌细胞(CaCO2、LoVo、HT-29)中的表达情况。将包装过载体pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-EDN3的病毒感染至结直肠癌细胞LoVo,MTS、克隆形成法、划痕法、Transwell检测EDN3对细胞增殖、克隆、迁移和侵袭能力的改变。Western blot检测LoVo中p-ERK1/2和t-ERK1/2蛋白改变。结果 EDN3在人结直肠癌组织和细胞中表达降低。表达EDN3基因的重组载体成功感染至LoVo细胞。MTS和克隆实验结果显示,实验组和对照组细胞增殖和克隆形成差异无统计学意义(P>0.05),划痕实验和Transwell实验提示实验组细胞迁移和侵袭能力明显低于对照组(P<0.01)。Western blot检测结果显示磷酸化的ERK1/2蛋白表达下降(P<0.01)。结论 EDN3在结直肠癌组织和细胞中表达降低,过表达EDN3能抑制结直肠癌LoVo细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与ERK1/2信号通路有关。
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单位重庆医科大学附属第一医院; 重庆市中医院