具有中央记忆T细胞表型的新型CAR-T细胞的制备及其对GD2阳性人骨肉瘤细胞的杀伤作用

作者：吕浩晗; 郑文静; 王延峰^*; 王涛^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2023, 39(10): 872-877.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009653

• 嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞
• 双唾液酸神经节苷脂
• 骨肉瘤
• 中央记忆T细胞
• 细胞免疫治疗

目的 通过优化嵌合抗原受体结构制备具有中央记忆T细胞表型并靶向双唾液酸神经节苷脂(GD2)的新型嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞，检测其对GD2阳性骨肉瘤细胞的杀伤能力。方法 构建由抗GD2单链抗体、 CD28铰链区及跨膜序列、 4-1BB胞内共刺激域和CD3ζ胞内段组成的新型嵌合抗原受体慢病毒载体，包装纯化慢病毒并感染Jurkat细胞，检测所得新型CAR-T细胞的感染效率、扩增能力、记忆表型以及不同骨肉瘤细胞株的GD2表达水平；慢病毒感染并筛选稳定表达荧光素酶和增强型红色荧光蛋白(eRFP)的GD2+MG63细胞系；荧光素酶实验检测新型CAR-T细胞对建系MG63细胞的杀伤能力。结果获得优化结构的新型CAR-T细胞，CAR阳性率达到92%以上；新型CAR-T细胞具有良好的体外扩增能力和中央记忆T细胞表型；杀伤实验显示新型CAR-T细胞能够有效杀伤GD2阳性的MG63骨肉瘤细胞。结论 通过优化CAR分子结构成功制备的新型CAR-T细胞具有中央记忆T细胞表型，能够有效杀伤GD2阳性骨肉瘤细胞。

• 单位
  延安大学; 基础医学院; 中国人民解放军空军军医大学; 生命科学学院