一种类风湿关节炎并间质性肺疾病大鼠模型的构建及评估

作者：欧慧萍; 吴趋荟; 袁多; 柳玉佳; 林辉; 李鑫^*; 范伏元^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(06): 1145-1152.

• 类风湿关节炎
• 间质性肺疾病
• 胶原诱导性关节炎
• 博来霉素

目的：构建一种模拟人类类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）并间质性肺疾病（RA-associated interstitial lung disease, RA-ILD）病理特征的RA-ILD大鼠模型。方法：将24只SD大鼠随机分为3组，分别为对照组、RA组和RA-ILD组，每组各8只。行胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis, CIA）造模，RA-ILD组同时采用气管内滴入博来霉素（bleomycin, BLM）行肺纤维化造模。观测大鼠体质量并进行关节炎评分；ELISA检测血清类风湿因子（rheumatoid factor, RF）、抗环瓜氨酸肽抗体（anti-cyclic citrullinate peptide antibody, Anti-CCP-Ab）、C反应蛋白（C-reactive protein, CRP）、基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7, MMP-7)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)含量；HE及Masson染色观察滑膜和肺组织病理学形态改变，依据染色结果评判大鼠RA-ILD发病率；免疫组化和Western blot方法检测肺组织MMP-7和白细胞介素22(interleukin-22, IL-22)表达水平。结果：（1）与对照组比，造模第0、7、14、21和28天，RA组和RA-ILD组大鼠体质量无显著差异，第35天时RA组和RA-ILD组大鼠体质量显著降低（P<0.05）;(2)与对照组相比，第7、14、21、28和35天时RA组和RA-ILD组关节炎评分均显著升高（P<0.05）。（3）ELISA结果显示，构建RAILD4周（37 d）后，RA组和RA-ILD组血清RF、Anti-CCP-Ab、TNF-α、MMP-7、TGF-β1及CRP含量均较对照组显著升高（P<0.05）;RA-ILD组血清Anti-CCP-Ab和TNF-α含量较RA组显著升高（P<0.05）。（4）构建RA-ILD模型4周后，HE染色发现RA组和RA-ILD组滑膜均出现明显的增生及炎症浸润现象；肺部皆可见明显肺泡结构紊乱，肺泡间隔增宽，肺泡壁增厚，大量炎性细胞渗出。构建RA-ILD模型4周后，Masson染色观察到明显的蓝色胶原纤维沉积及纤维灶形。（5）构建RA-ILD模型4周后，与对照组相比，RA组和RA-ILD组大鼠RA-ILD发病率显著升高（P<0.05）；与RA组相比，RA-ILD组RA-ILD发病率显著升高（P<0.05）。（6）免疫组化和Western blot结果显示，构建RA-ILD模型4周后，与对照组相比，RA组和RA-ILD组肺组织MMP-7和IL-22表达显著上调。结论：SD大鼠经CIA联合BLM诱导建立的RA-ILD模型可作为研究RA-ILD发病机制的一种实验动物模型。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学; 湖南中医药高等专科学校