人胃癌细胞BGC823中miR-200c靶基因产物波形蛋白的检测及功能研究

作者：杨翠萍; 杨晓金; 杨燕萍; 张梦茵; 谢玲; 俞骁珺; 蔡波尔; 陈登宇; 陈平^*; 吴云林^*

来源：诊断学理论与实践, 2020, 19(04): 414-419.

DOI：10.16150/j.1671-2870.2020.04.017

• 胃癌
• 锌指E盒增强子结合蛋白2
• 波形蛋白

目的:采用RNA靶向干扰技术,研究人胃癌细胞BGC823中微小RNA(microRNA, miRNA, miR)-200c的靶点锌指E盒增强子结合蛋白2(zinc finger E-box enhancer binding protein 2, ZEB2)基因的表达情况,并检测相关的波形蛋白基因表达情况,观察miR-200c对胃癌BGC823细胞功能的影响。方法:构建ZEB2基因表达的干扰质粒shZEB2,用Lipofectamine 2000转染胃癌BGC823细胞,用G418筛选稳定转染细胞株,进行实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测人BCG823细胞中ZEB2 mRNA、miR-200c及波形蛋白基因的表达水平,并用蛋白印迹法检测ZEB2蛋白、波形蛋白表达水平,噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT)法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果:干扰ZEB2分子表达后,miR-200c表达水平增高,而BGC823细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显下降。结论:ZEB2是miR-200c的检测靶点,干扰ZEB2后,胃癌细胞BGC823的增殖、迁移及侵袭能力明显降低。

• 单位
  蚌埠医学院; 上海交通大学医学院附属瑞金医院; 江西省九江市第一人民医院