大鼠低氧诱导因子-1α基因克隆和表达载体的构建

作者：张振; 王君; 吕苗苗; 肖志彬; 张玉明; 高昌俊; 孙绪德

来源：现代生物医学进展, 2010, (14): 2611-2614.

• 低氧诱导因子-1&alpha
• 脊髓缺血再灌注损伤
• 基因克隆
• 大鼠 Hypoxia inducible factor-1&alpha
• Spinal cord ischemia-reperfusion injury
• Gene clone
• Rat

目的:对低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因进行克隆及载体构建,为进一步研究HIF-1基因转染骨髓基质细胞移植治疗脊髓缺血再灌注损伤提供实验依据。方法:制备大鼠脊髓缺血再灌注模型,提取脊髓组织mRNA,进行逆转录聚合酶链式反应(RT-PR)合成HIF-1α cDNA,并对其进行PCR扩增,对PCR产物进行纯化及连接T载体、转化感受态和双酶切鉴定,并将HIF-lα克隆入pcDNA3.l载体。结果:PCR扩增的片段长度为2472bp与预期结果一致;利用BamHI和XbaI双酶切能够切出大小约2472bP的目的片段,与PCR产物片段大小相等,...

• 单位
  第四军医大学