稳定过表达成纤维细胞激活蛋白的口腔鳞状细胞癌细胞株的构建

作者：赵萌; 邵婷如; 黄佳欣; 陈跃川; 吕晓智

来源：华西口腔医学杂志, 2017, 35(05): 468-472.

DOI：10.7518/hxkq.2017.05.004

• 成纤维细胞激活蛋白
• 慢病毒载体
• 过表达
• 口腔鳞状细胞癌

目的构建人成纤维细胞激活蛋白(FAP)过表达慢病毒载体,转染口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞株SCC9,构建稳定过表达FAP的OSCC细胞株。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术获得FAP片段,利用基因重组技术构建过表达FAP的慢病毒载体,包埋病毒并收集上清液感染SCC9细胞株,通过流式细胞荧光分选技术(FACS)进行筛选,获得稳定过表达FAP的SCC9细胞株。结果对阳性克隆进行酶切鉴定和基因测序证明FAP的慢病毒载体构建成功,实时荧光定量PCR和Western blot检测结果证明成功构建稳定过表达FAP的SCC9细胞株。结论本研究有助于获得纯化FAP蛋白,为进一步研究FAP在OSCC发生发展过程中的机制奠定基础。

• 单位
  南方医科大学; 南方医科大学南方医院