靶向表皮生长因子受体shRNA质粒表达载体的构建和鉴定

作者：邬跃刚; 曹政; 吴相柏; 魏亚元; 霍磊; 陶凯雄

来源：山东医药, 2006, (36): 11-12.

DOI：10.3969/j.issn.1002-266X.2006.36.006

• 表皮生长因子受体
• 小分子干扰RNA
• 短发卡状RNA
• 质粒载体

目的 构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)的短发卡状RNA(shRNA)质粒表达载体并进行鉴定.方法 设计两个小分子干扰RNA(siRNA)序列,体外合成DNA模板引物,与Pgenesil-1质粒构建成编码shRNA的表达载体,进行酶切鉴定和测序,再转染人大肠癌LoVo细胞,进行荧光摄像和G418抗性筛选.结果 构建的质粒表达载体完全符合设计要求,转染成功的细胞在荧光显微镜下显示为绿色,G418

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院; 宜昌市第二人民医院