Peroxiredoxin 2基因RNAi慢病毒载体构建及对SW480细胞增殖的影响

作者：冯继红; 傅仲学; 文坤明; 卢伟东; 王昊; 陈旺盛; 郭金宝; 张寿儒

来源：重庆医学, 2015, 44(01): 14-17+20.

• 结直肠肿瘤
• 基因表达
• 绿色荧光蛋白质类
• 过氧化还原蛋白2
• 慢病毒载体

目的构建Peroxiredoxin2(PRDX2)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,探讨PRDX2基因干扰后对结直肠癌SW480细胞增殖的影响。方法设计、合成靶向PRDX2的RNA干扰的序列,构建pGC-EGFP-shPRDX2慢病毒载体并进行鉴定,同时应用qRT-PCR和Western blot方法观察转染的SW480结肠癌细胞PRDX2 mRNA和蛋白表达的抑制效果,并通过MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖变化。结果成功构建PRDX2基因慢病毒载体并经测序证实;pGCEGFP-shPRDX2可有效抑制结直肠癌SW480细胞PRDX2的表达,感染慢病毒的SW480细胞中PRDX2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);SW480细胞经PRDX2 RNA干扰后其生长和增殖能力显著降低(P<0.05)。结论 PRDX2基因RNAi慢病毒表达载体在SW480细胞中表达稳定可靠,PRDX2基因干扰后有效抑制了结直肠癌SW480细胞的增殖和生长,为进一步探讨PRDX2在结直肠癌发生、发展及转移中的作用奠定基础。

• 单位
  泸州医学院附属医院; 重庆医科大学附属第一医院; 遵义医学院附属医院