积雪草酸通过活性氧诱导乳腺癌4T1细胞凋亡的机制研究

作者：杨兴旺; 田苗苗; 马春宇^*

来源：中药新药与临床药理, 2022, 33(06): 770-776.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2022.06.007

• 积雪草酸
• 乳腺癌4T1细胞
• 活性氧
• 凋亡

目的 探讨积雪草酸(Asiatic acid,AA)通过活性氧(ROS)对乳腺癌4T1细胞凋亡的影响及相关机制。方法 通过MTT法和集落形成法检测不同浓度AA对4T1细胞增殖作用的影响；采用JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化；Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡情况；Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率；DCFH-DA探针法检测细胞ROS水平；RT-PCR法检测4T1细胞Bax、Caspase3、Bcl-2及细胞色素C(Cytochrome C)mRNA表达水平；Western Blot法检测4T1细胞Bax、cleaved-Caspase3、Bcl-2及Cytochrome C蛋白的表达。结果 10～100μmol·L-1AA呈浓度依赖性地抑制4T1细胞增殖(P<0.01)，其作用24 h的IC50值为41.01μmol·L-1。与对照组比较，AA组的细胞集落形成能力显著下降(P<0.01)；红/绿相对荧光强度(线粒体膜电位)显著降低(P<0.01)；亮蓝色荧光强度(凋亡细胞数量)显著增加(P<0.01)；细胞凋亡率显著升高(P<0.01);ROS水平显著升高(P<0.01);Bcl-2 mRNA表达显著下调(P<0.01),Bax、Caspase3、Cytochrome C m RNA表达明显上调(P<0.05,P<0.01);Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01),Bax、cleavedCaspase3、Cytochrome C蛋白表达显著上调(P<0.01)。AA与抗氧化剂NAC联用后，能够逆转AA对4T1细胞凋亡及凋亡相关蛋白的作用。结论 AA能够促进乳腺癌4T1细胞内ROS水平升高，诱导4T1细胞凋亡。

• 单位
  锦州医科大学