牙龈卟啉单胞菌PrtC蛋白体外表达、纯化及功能初探

作者：高晓雪; 汪颖; 夏荣^*

来源：安徽医科大学学报, 2020, 55(10): 1515-1519.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.10.007

• 牙龈卟啉胞菌
• PrtC蛋白
• 胶原酶
• 蛋白表达

目的牙龈卟啉单胞菌PrtC蛋白体外表达纯化及功能初探。方法全基因合成牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)ATCC33277中prtC基因,构建重组表达载体p29-prtC,生物信息学分析和低温诱导表达、SDS-PAGE、Western blot鉴定,酶解法检测胶原酶的功能。结果成功构建了PrtC蛋白原核表达载体,在大肠杆菌表达体系内获得可溶蛋白表达,通过亲和层析和分子筛层析纯化出高纯度且较稳定的PrtC蛋白,并且实验证明它具有降解胶原蛋白的能力。结论体外生化实验说明PrtC蛋白具有胶原蛋白酶活性,并且为后续解析PrtC蛋白的结构奠定了基础。

• 单位
  安徽医科大学第二附属医院; 中国科学技术大学