融合PCR技术在山羊痘病毒表达载体构建中的应用

作者：宋书婷; 张孝忠; 张秀萍; 陈宏伟; 李有文

来源：黑龙江畜牧兽医, 2017, (13): 1-291.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.20170427.002

• 融合PCR
• 山羊痘病毒
• 表达载体
• 同源重组
• 载体构建

为了构建山羊痘病毒表达载体,试验利用融合PCR的方法连接4种组合的3个不同来源的基因片段,插入含有TK基因的载体中,快速构建羊痘病毒表达载体,并转染至BHK-21细胞中进行验证。结果表明:利用融合PCR技术成功融合了P11-7.5-ZSG、P11-7.5-GFP、I1L-7.5-ZSG、I1L-7.5-GFP 4个组合中的3个基因片段,产物长度均在1.2 kb左右,并插入PGEM-TK载体中,构建了4个表达载体,测序结果与理论上100%同源,转染BHK-21细胞可见绿色荧光。说明试验成功构建了4个山羊痘病毒的表达载体。

• 单位
  新疆生产建设兵团; 动物科学学院; 塔里木大学