摘要
目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)重组Hp1188蛋白免疫反应性及口服免疫后对小鼠的保护效果,以探讨其在制备预防性疫苗中的价值。方法纯化H. pylori重组Hp1188蛋白,Western blot鉴定其免疫反应性。将纯化的重组Hp1188蛋白作为H. pylori抗原,ELISA法检测100例临床病例血清样本的相应抗体,并与尿素呼气试验(urea breath test,UBT)和快速尿素酶试验(rapid urease test,RUT)结果进行比较,评价其临床应用的可行性。将纯化的重组Hp1188蛋白免疫小鼠后,用H. pylori悉尼株1(Sydney strain 1,SS1)攻击感染,ELISA法检测小鼠血清和小肠黏液中抗Hp1188抗体(IgG、IgA和sIgA)产生情况;胃黏膜H. pylori培养、RUT、病理组织学检查观察H. pylori定植量及炎症情况。结果重组Hp1188蛋白纯化后纯度达90%,浓度为1.0 mg/mL。Western blot分析显示,该蛋白能被H. pylori患者血清识别。血清学结果显示,Hp1188抗体试剂检测的敏感性为93.8%,特异性为94.3%。经重组Hp1188蛋白免疫后,小鼠体内IgG、IgA、sIgA含量均明显高于PBS对照组(P <0.05),H. pylori活菌定植量、RUT及病理学检查指标均明显低于PBS对照组(P <0.05),对小鼠的保护率为70%。结论 Hp1188蛋白对小鼠具有免疫保护作用,本研究为研制H. pylori相关疫苗提供了试验依据。
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